Se realizó la caracterización citogenética de Haemulon flavolineatum mediante las técnicas de tinción convencional con Giemsa, tinción argéntica y bandas C. El cariotipo de esta especie estuvo caracterizado por 48 cromosomas acrocéntricos y un Número Fundamental (NF) de 48. La especie posee un solo par de cromosomas portador de Regiones Organizadoras del Nucleolo (RONs) en posición intersticial. La heterocromatina constitutiva (Bandas C) se localizó en posición centromérica en todos los cromosomas. El cariotipo descrito concuerda con la configuración citogenética observada en todas las especies del género Haemulon, hasta ahora estudiadas y refuerza la opinión según la cual existe una marcada estabilidad en la macroestructura cromosómica en la subfamilia Haemulinae.